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RealPAGE凝膠蛋白電泳試劑盒
 產品貨號: RTD6126
 產品名稱: RealPAGE凝膠蛋白電泳試劑盒
 產品價格/規格: 10板膠/50板膠 100元/400元
 產品說明書: 點擊查看
 更新時間: 2019-08-08
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  • RealPAGE凝膠蛋白電泳試劑盒

    RealPAGE Gel Protein Electrophoresis Kit

    ●    產品貨號及規格:

    貨號

    名稱

    組份貨號

    組份名稱

    規格

    RTD6126-10

    (10板膠)

    RTD6126-0508-01

    8% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-01

    5%濃縮膠預混液

    15 ml*

    RTD6126-08-01

    8%分離膠預混液

    50 ml*

    RTD6126-0510-01

    10% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-01

    5%濃縮膠預混液

    15 ml

    RTD6126-10-01

    10%分離膠預混液

    50 ml

    RTD6126-0512-01

    12% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-01

    5%濃縮膠預混液

    15 ml

    RTD6126-12-01

    12%分離膠預混液

    50 ml

    RTD6126-0515-01

    15% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-01

    5%濃縮膠預混液

    15 ml

    RTD6126-15-01

    15%分離膠預混液

    50 ml

    TM1230-03

    10×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    500 ml (干粉)

    10% APS/TEMED

    5ml/0.5ml

    xg

    RTD6126-50

    (50板膠)

    RTD6126-0508-02

    8% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-02

    5%濃縮膠預混液

    80 ml*

    RTD6126-08-02

    8%分離膠預混液

    250 ml*

    RTD6126-0510-02

    10% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-02

    5%濃縮膠預混液

    80 ml

    RTD6126-10-02

    10%分離膠預混液

    250 ml

    RTD6126-0512-02

    12% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-02

    5%濃縮膠預混液

    80 ml

    RTD6126-12-02

    12%分離膠預混液

    250 ml

    RTD6126-0515-02

    15% RealPAGE凝膠預混液

    RTD6126-05-02

    5%濃縮膠預混液

    80 ml

    RTD6126-15-02

    15%分離膠預混液

    250 ml

    TM1230-02

    10×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    2×1(干粉)

    10% APS/TEMED

    5ml/0.5ml

    xg

    * 制備一塊1 mm8cm×8cm凝膠需要分離膠預混液約4.5 ml,濃縮膠預混液約1.5 ml。

    RTD6126-10每套溶液可以配制至少10板凝膠; RTD6126-50每套溶液可以配制至少50板凝膠;

    產品簡介:

    該產品利用聚丙烯酰胺凝膠電泳原理,采用合理設計的預混合配方和配制流程,可在20-30分鐘內配制得到高質量的聚丙烯酰胺凝膠,用于變性和非變性蛋白凝膠電泳。本產品提供四種常用分離膠濃度8%、10%、12%和15%,可以滿足絕大多數蛋白電泳需求。

    特點:

    1. 方便:分離膠和濃縮膠的制備只需用預混液加上APS和TEMED即可;

    2. 快速:20-30分鐘內即可制備好凝膠。

    3. 安全:預混液,不用接觸有毒粉末。

    4. 穩定:獨特pH中性預混液配方,凝膠4℃穩定貯存一年。

    貯存: 4貯存。有效期一年。

    使用說明:

      凝膠制備:

    以下程序以制備一塊1 mm厚,大小8cm×8cm凝膠為例,實際操作按照使用膠板規格調整試劑用量。

    1.參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具。

    2. 根據下表參考選擇合適的凝膠濃度

    不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍

    SDS-PAGE分離膠濃度

    最佳分離范圍

    8%

    30-90kD

    10%

    20-80kD

    12%

    12-60kD

    15%

    10-40kD

    3.分離膠配制:

    參照下表,在凝膠模具中灌入分離膠溶液(凝膠液加至距前玻璃板頂端約1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可),然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-2 cm的水層,使凝膠表面保持平整;靜置10-15分鐘(25℃),待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面后,說明凝膠已聚合;去除覆蓋在分離膠上的水層。

    分離膠配制

    濃縮膠配制

    分離膠預混液

    4.5 ml

    /

    5%濃縮膠預混液

    /

    1.5 ml

    TEMED

    4.5 μl

    1.5 μl

    10% APS

    45 μl

    15 μl

    4.濃縮膠配制:

    將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端;將梳子插入凝膠內,避免產生氣泡;靜置15-20分鐘(25℃),等待濃縮膠聚合。

    注:凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時,聚合較快;冬天氣溫低時,聚合時間會延長。可以根據環境溫度的不同調節APS的加入量。

      電泳:

    1. Tris-MOPS-SDS電泳緩沖液配制:

    10×Tris-MOPS-SDS緩沖液 溶液型 配制方法:

    貨號

    10×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    干粉型

    10×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    溶液型 配制量

    TM1230-03

    500ml 干粉

    加超純水,徹底溶解后定容至 500 ml

    TM1230-02

    1 干粉

    加超純水,徹底溶解后定容至 1000 ml

    注: = 1 \* GB3 10×Tris-MOPS-SDS緩沖液溶液 4避光貯存,如溶液變黃,表明試劑失效,不能使用。

    = 2 \* GB3 本產品提供10×Tris-MOPS-SDS電泳緩沖液,適用于變性蛋白電泳。如要進行非變性電泳,請自行配制不含SDSTris-MOPS電泳緩沖液(見緩沖液配方)


    電泳前,按照下表配制1×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    1×Tris-MOPS-SDS緩沖液配制量

    400 ml

    1000 ml

    10×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    40 ml

    100 ml

    超純水

    360 ml

    900 ml

    注:400 ml 1×Tris-MOPS-SDS緩沖液可以完成一次電泳。

    2. 凝膠凝固好后,上樣,電泳。

    電泳條件

    電泳緩沖液

    穩壓電泳

    起始電流

    (一板膠)

    結束電流

    (一板膠)

    電泳時間

    1×Tris-MOPS-SDS緩沖液

    140 V

    90-120 mA

    30-45 mA

    45-70分鐘

    注: = 1 \* GB3 本產品使用Tris-MOPS-SDS緩沖液或Tris-MES-SDS緩沖液,不適合用Tris-甘氨酸-SDS緩沖液電泳

        = 2 \* GB3 1×Tris-MOPS-SDS緩沖液可以回收利用2-3次。

    三  緩沖液配方:

    1  10x Tris-MOPS-SDS緩沖液 (1 L)    (Cat No: TM1230-02) 

    組分濃度:0.5 MTris,0.5 MMOPS, 1% SDS,10mMEDTA 2Na,50mMNaHSO3

    Tris base 60.6 g

    MOPS   104.6 g

    SDS        10 g

    EDTA Na      3 g

    NaHSO3    5.2 g

    用滅菌ddH2O定容至1 升

    Do not adjust the pH (~pH 7.7)

    2  10x Tris-MOPS緩沖液 (1 L)    (Cat No: TM1240-02) 

    組分濃度:0.5 MTris,0.5 MMOPS,10mMEDTA 2Na

    Tris base 60.6 g

    MOPS   104.6 g

    EDTA Na      3 g

    用滅菌ddH2O定容至1 升

    Do not adjust the pH (~pH 7.7)

     


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