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DNase I溶液(蛋白提取用)
 產品貨號: RTT2103
 產品名稱: DNase I溶液(蛋白提取用)
 產品價格/規格: 10KU 300元
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 更新時間: 2019-06-24
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  • DNase I溶液(蛋白提取用)

    DNase I Solutionfor protein isolation

     

    ●     產品組成:

    貨號

    名稱

    規格

    RTT2103-01

    DNase I粉末

    10 KU

    RTT2103-02

    DNase I溶解液

    5 ml

    RTT2103-03

    1M MgCl2

    5 ml

    ● 保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。

    產品簡介:

    脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶,可用于降解單鏈或雙鏈DNA,其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產生帶有5'-磷酸基團和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。   本產品能迅速水解核酸,降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產量。該酶可以與細菌蛋白提取液和RIPA 裂解液等蛋白抽提試劑配合使用。

    本產品RNase活性未檢測,不能用于反轉錄反應(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請選擇RNase-free DNase I(貨號:RTT2014)。

    活性定義:

    One unit of the enzyme completely degrades 1 μg of DNA in 10 min at37°C. 

    DNaseI溶解液組份:

    20 mMsodium acetate pH 6.5, containing5 mMCaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol

    DNaseI失活或抑制:

    加入EDTA至終濃度為2.5mM后,65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,達到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。

    使用方法:

     1、DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混勻,配成濃度為2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。

    2、蛋白提取液中按照1/100 體積加入DNase I溶液(使其終濃度為20U/ml),1/100體積加入1MMgCl2,37℃處理30-60分鐘。

       注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否則會降低DNase的消化能力。

    3、繼續后續蛋白提取實驗。


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